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首頁 >> 新聞中心 >>新聞中心 >> 非瘟檢測,一個樣本的費用多少?豬病檢測知識知多少?目前豬場或檢測機構主要開展的檢測項目及方法介紹
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非瘟檢測,一個樣本的費用多少?豬病檢測知識知多少?目前豬場或檢測機構主要開展的檢測項目及方法介紹

先來看一下檢測項目和方法


檢測項目里,一方面就是抗體監測。目前主要用的是酶聯免疫吸附試驗,就是ELISA。通過抗體檢測,一方面可以評估豬場的抗體水平,同時還可以判斷豬場是否有野毒感染。


表1展示了曾經為一家豬場做的藍耳病抗體檢測。針對藍耳病,有些豬場在用疫苗,有些豬場沒有用疫苗,所以檢測到抗體之后,要進行綜合分析:如果有抗體檢出,要了解豬場的免疫情況,如果沒有免疫過疫苗,有抗體檢出,應該說豬場有感染,把它稱為感染抗體,判斷是否感染有經驗值,S/P≥2.5就證實豬場有感染;如果說豬場免疫過疫苗,有抗體檢出,應該就是免疫產生的抗體。


表1 某豬場藍耳抗體檢測結果

編號

OD值

S/P值

結果

北小3

0.588

1.435

陽性

64

0.523

1.267

陽性

北大欄1

0.83

2.062

陽性

O73

0.07

0.093

陰性

欄3

0.14

0.275

陰性

OO5

0.075

0.106

陰性

南4

0.146

0.290

陰性

O63

0.113

0.205

陰性

南西1

1.035

2.593

陽性

定4

0.748

1.850

陽性

總檢測份數

10

臨界值

0.4。S/P≥0.40+

陽性率

50.0%

樣本變異系數

0.92


表2是為豬場所做的偽狂犬抗體檢測。對于偽狂犬抗體檢測,目前我國有這么兩類檢測試劑盒,一是檢測gB抗體,指的是免疫所產生的抗體,另外是gE抗體,主要指的是感染產生的抗體。目前我國用偽狂犬的基因缺失疫苗來進行免疫,與此同時可以檢測gE抗體,如果說有gE抗體檢出,就證實豬場中有偽狂犬野毒感染。


表2-1 偽狂犬gB抗體監測(免疫抗體)

編號

OD值

S/N值

結果

北小3

0.059

0.045

陽性

64

0.096

0.073

陽性

北大欄1

0.079

0.060

陽性

O73

0.057

0.043

陽性

欄3

0.054

0.041

陽性

OO5

0.051

0.039

陽性

南4

0.05

0.038

陽性

O63

0.058

0.044

陽性

南西1

0.06

0.045

陽性

定4

0.068

0.051

陽性

總檢測份數

10

臨界值

0.6~0.7。陰性:S/N>0.70,陽性:S/N≤0.60,可疑:0.6<S/N≤0.70

陽性份數

10

陽性率

100.0%

樣本變異系數

0.23


表2-2 偽狂犬gB抗體檢測gE抗體監測(感染抗體)

編號

OD值

S/N值

結果

北小3

1.486

1.046

陰性

64

0.841

0.592

陽性

北大欄1

1.362

0.958

陰性

O73

0.076

0.053

陽性

欄3

1.415

0.996

陰性

OO5

0.06

0.042

陽性

南4

0.079

0.056

陽性

O63

0.146

0.103

陽性

南西1

1.537

1.082

陰性

定4

0.05

0.035

陽性

總檢測份數

10

臨界值

0.6~0.7。陰性:S/N>0.70,陽性:S/N≤0.60,可疑:0.6<S/N≤0.70

陽性份數

6

陽性率

60.0%

樣本變異系數

0.97


第2個檢測項目是抗原檢測,可以用于疾病的診斷,包括流行病學調查,同時可以通過定量PCR檢測方法對疫苗中抗原含量進行評價,比如有些豬場使用實時熒光定量PCR的方法來進行抗原含量檢測。目前PCR的檢測方法分為普通PCR和實時熒光定量PCR,如很多實驗室自建的等溫檢測方法,包括LAMP以及重組酶介導的等溫擴增(RPA),這兩類方法敏感性比較高,但也會出現假陽性的情況。所以在臨床中,普遍采用的是PCR和實時熒光定量PCR進行抗原檢測。


第3個,目前在檢測過程中也可以做耐藥性分析。耐藥性分析主要通過藥敏實驗,為*病的防控來篩選敏感藥物。可以用發病豬的組織涂抹相應的培養基,然后貼上藥敏片,最后根據藥敏片抑菌圈的大小來判定什么樣的藥比較敏感,也可以分離*來做藥敏實驗。


第4個就是基因測序,目前在豬中用的最多的就是對藍耳病病毒的測序。通過測序,可以分析藍耳病病原的變異情況,從而在臨床中篩選匹配的疫苗。大家知道,藍耳病是在豬中危害比較大的傳染病,從1996年傳入我國之后,藍耳病的毒株具有多樣性。目前,在臨床中主要有三個毒株,一是經典毒株,二是高致病毒株,還有類NADC30毒株。


在藍耳疫苗的使用過程中,有兩類疫苗,經典毒株疫苗和高致病性毒株疫苗,到底該選擇哪個?我的觀點是這樣的:可以根據豬場中藍耳病的流行情況,選擇相應的毒株,比如說豬場中主要發生和流行的是經典毒株,就可以用經典毒株的疫苗去免疫防控,如果流行的是高致病毒株,就可以選擇高致病毒株的疫苗進行防控。因此有必要對它的基因進行分析,目前主要是分析NSP2以及GP5基因。


以上是目前豬場或者檢測機構主要開展的檢測項目,以及使用的方法。


針對這些項目,檢測機構就有相應的平臺,包括洗滌消毒室、病原學檢測室、血清學檢測室,另外還有分子生物學檢測實驗室,有些單位還有病理學檢測實驗室。依靠這樣的平臺,就可以從事血清學、*學、病毒學、分子生物學的檢測,并能評估耐藥風險,因此可以為豬場提供相應的服務。目前大多數檢測機構,對常發的病,比如藍耳病、圓環病毒、豬瘟、偽狂犬、細小、乙型腦炎等都可以進行檢測。



- 以下是部分問答 -


問題1:現在非洲豬瘟全國泛濫,對于基層檢測有什么更好的方式或者是什么樣的建議?

答:現在基層生產中由于缺乏相應的檢測平臺,所以這方面會有一定的困難,建議如果在生產中沒有檢測設備可以用檢測試劑條進行初步的篩查,確診就需要將收集的樣本送到專業的實驗室來進行檢測。


問題2:非瘟檢測,一個樣本的費用多少?

答:對于病原檢測目前用到的試劑盒有兩大類:一是核酸類的檢測試劑盒,另一個是檢測卡。核酸的檢測試劑盒包括PCR、實時熒光定量PCR兩類,檢測費用在200元左右。抗體檢測主要用的是酶聯免疫吸附實驗,樣本的費用大概是30~50元。


問題3:導致檢測結果偏差的主要因素有哪些?

答:豬場在送檢的時候可能會把同樣的樣本送給2~3家或者更多的單位進行檢測。關于檢測誤差有以下幾個方面的因素:*是與送檢的樣本有很大的關系,同一頭豬采取樣本的部分不同可能檢出的結果就不同;第二是盡量送檢到正規的檢測機構來進行檢測,如果自行檢測,*購買正規的檢測試劑盒,來避免檢測結果出現誤差。


問題4:檢測偽狂犬中和抗體有什么意義?

答:中和抗體是豬得到保護很重要的抗體,但在臨床檢測中對中和抗體檢測的還不是很多。


問題5:膠體金檢測手段可信嗎?

答:膠體金指的就是檢測卡,它的特點是快速,基本上5分鐘就可以出結果,主要是基層或是現場的快速診斷。但是跟目前抗原檢測類的比較起來,它的敏感性較差,不夠準確。農業農村部在第1批所發布的非洲豬瘟中國檢測試劑盒中曾經也做過比對實驗,檢測卡的敏感性在66%~67%。


問題6:直接用組織做藥敏試驗科學么,會不會培養基中正常菌群占絕大部分?

答:組織做藥敏試驗是目前藥敏實驗中很重要的方法,這種方法比較快,今天做明天就可以出結果。如果需要精準*是用純培養物來做,但在臨床中涉及到要及時的防控,需要迅速出結果,建議選取有代表性的樣品組織。藥敏實驗對培養基選擇也是很重要的,需要給*培養提供充足的營養因子如血清等。


問題7:檢測結果的分析與臨床脫鉤如何指導生產?

答:這個問題也是廣大養殖戶普遍關心的問題,就是送檢結果可能跟他預想的可能不太一樣。所以送檢的樣本一定要有代表性,送檢的樣本是有發病典型癥狀的豬2~3頭,這樣檢測的結果準確度會高一些。


問題8:如果懷疑豬感染藍耳病,一般采集哪些病料比較適合檢測?

答:豬的淋巴結、脾臟、肺臟、腎臟都可以送檢進行檢測。另外目前有些新的技術也可以使比如唾液用于藍耳病的檢測。


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