酶聯免疫吸附測定試劑盒是酶免疫測定中廣泛應用的技術�；痉椒ㄊ菍⒁阎目乖蚩贵w吸附在固體載體表面，使酶標記的抗原和抗體在固體表面反應，并用洗滌法洗滌液相中的游離成分。通常使用ELISA酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。有兩種方法：雙抗體夾心法和間接法。前者用于檢測大分子抗原，后者用于檢測特異性抗體。
基本原理酶聯免疫吸附試劑盒法的基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價結合。這種組合不會改變抗體的免疫特性，也不會影響酶的生物活性。酶標記的抗體可以與吸附在固體載體上的抗原或抗體特異性結合。滴下底物溶液后，底物可以在酶的作用下將其氫供體從無色還原型變為有色氧化型，從而發生顯色反應。因此，相應的免疫反應可以通過底物的顏色反應來確定。顯色反應的深度與樣品中相應抗體或抗原的量成比例。這種顯色反應可以通過酶聯免疫吸附法定量測定，該法結合了酶聯化學反應的敏感性和抗原抗體反應的特異性，使酶聯免疫檢測法成為一種特異、靈敏的檢測方法。
ELISA試劑盒操作步驟
1.確定本試驗所需的涂有抗體的酶標記板孔的數量。
2.將0.1ml多重稀釋的標準品依次加入一排7個孔中，僅加入樣品稀釋劑的孔作為對照。處理后，每孔加入100ul。
3.蓋上酶標記板，在37℃下反應90分鐘。
4.反應完成后，用自動洗板機吸收酶標板中的液體；或者抖掉酶標簽板上的液體，將其拍在吸水紙上。清洗兩次。
5.按每孔0.1ml的順序加入制備的生物素抗體工作溶液。37℃反應60分鐘。
將6.0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次，每次浸泡約1分鐘。
7.按每孔0.1ml的順序加入制備的ABC工作溶液。37℃反應30分鐘。
將8.0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次，每次浸泡約1-2分鐘。
9.每孔依次加入0.1ml TMB顯色工作液，在37℃黑暗中反應。在反應過程中，要經常觀察。當標準的前3-4個孔具有明顯的藍色梯度，而最后3-4個孔沒有明顯差異時，添加0.1ml/孔TMB終止溶液。（顏色反應不應超過30分鐘）。
10.用酶標記物測量450nm處的O.D.值。
11.根據樣品的吸光度值在坐標上找到相應的濃度。用戶還可以使用各種應用程序進行計算。應記住，樣品的實際濃度應為×N
