在ELISA試驗測定方法中有不少因素影響，其實際操作流程還是要遵循相應的技術規范和要求。除正常反應之外，中海在檢查核驗中還常常見到出現假陽性或假陰性結果問題。

ELISA試驗不成功的四個關鍵要點：

ELISA實驗失敗關鍵要點❶標本自身的影響:

溶血標本和混有紅細胞的血清經ELISA法試驗檢測易產生假陽性。可能是紅細胞中的血紅素或溶血血清中包含過氧化物酶的紅蛋清，在清洗過程中通常不容易完全洗干凈。它能使過氧化氫釋放原始氧，從而催化底物四甲基聯苯胺生成可溶性有色物質，即變成藍色，產生假陽性。造成嚴重溶血標本禁用。

ELISA試驗不成功關鍵要點❷標本被*病毒感染:

因為*病毒或許包含內源性辣根過氧化物酶，被*感染的樣品與溶血樣品一致，或許產生非特異性顯色，勢必會影響ELISA實驗測定方法*終結果。

ELISA實驗失敗關鍵要點❸標本儲藏保管不合理:

標本在冰箱中放置時長太久，會造成間接ELISA測定本底過深，產生假陽性。為了更好地克服上述影響，ELISA試劑盒測定方法的血清樣品應新鮮采集。如無法馬上測定方法，可將五日內測定方法的血清樣品儲存在四攝氏度，七天過后測定方法的血清樣品應較低溫度冷藏。冷凍儲藏和解除凍結的標本，造成雞蛋白質部分集中化，不均勻分布，應充分融合后進行測量。此時應當輕輕地融合，無需明顯振蕩。

ELISA試驗不成功關鍵要點❹標本凝結并不充分:

日常工作，偶而為了更好地贏得快速檢測的時長，通常在血液進行凝結前，利用強制離心分離血清，使一部分纖維蛋白原殘留在血清中，中海ELISA測定方法時可產生看得見的纖維蛋白塊，易于產生假陽性*終結果。于是采集后應當使血樣充分凝結，接著進行血清分離。